黨堅(jiān)持團(tuán)結(jié)反對(duì)分裂、堅(jiān)持進(jìn)步反對(duì)倒退，同國(guó)民黨頑固派的反共活動(dòng)進(jìn)行了堅(jiān)決斗爭(zhēng)。1939年冬至1940年春，國(guó)民黨頑固派掀起第一次反共高潮，黨給予堅(jiān)決回?fù)簟?941年初，國(guó)民黨頑固派制造震驚中外的皖南事變。新四軍軍部及所屬部隊(duì)9000余人，在向北轉(zhuǎn)移途中遭到國(guó)民黨軍8萬(wàn)余人圍攻，除約2000余人突圍外，一部被打散，大部壯烈犧牲或被捕，軍長(zhǎng)葉挺在同國(guó)民黨軍進(jìn)行戰(zhàn)場(chǎng)談判時(shí)被扣押，副軍長(zhǎng)項(xiàng)英遇害。事變發(fā)生后，蔣介石竟誣稱新四軍“叛變”，宣布取消其番號(hào)。
面對(duì)國(guó)民黨頑固派掀起的又一次反共高潮，共產(chǎn)黨采取軍事上嚴(yán)守自衛(wèi)、政治上堅(jiān)決反擊的方針。中共中央軍委宣布重建新四軍軍部，任命陳毅為代軍長(zhǎng)，劉少奇為政治委員。毛澤東揭露國(guó)民黨頑固派破壞抗戰(zhàn)的陰謀，提出懲辦禍?zhǔn)?、釋放葉挺、廢除國(guó)民黨一黨專政、實(shí)行民主政治等十二條解決辦法。周恩來在重慶向國(guó)民黨當(dāng)局提出嚴(yán)重抗議，并親筆題詞“為江南死國(guó)難者志哀”和“千古奇冤，江南一葉；同室操戈，相煎何急?!”這兩條充滿悲憤的題詞在《新華日?qǐng)?bào)》登出，有力地揭露和聲討了國(guó)民黨頑固派的反動(dòng)行徑。
全國(guó)人民及國(guó)際輿論普遍同情共產(chǎn)黨，譴責(zé)國(guó)民黨當(dāng)局消滅異己、破壞抗戰(zhàn)。國(guó)民黨頑固派陷于極端孤立的境地，其反共活動(dòng)不得不有所收斂。黨以大局為重的正確措置，使極度危急的國(guó)內(nèi)時(shí)局得以扭轉(zhuǎn)，黨在全國(guó)的政治地位空前提高。
黨深刻地總結(jié)同國(guó)民黨頑固派斗爭(zhēng)的經(jīng)驗(yàn)，豐富和發(fā)展了統(tǒng)一戰(zhàn)線的策略。這主要是:在抗日民族統(tǒng)一戰(zhàn)線中要采取“發(fā)展進(jìn)步勢(shì)力，爭(zhēng)取中間勢(shì)力，孤立頑固勢(shì)力”的總方針，在反對(duì)國(guó)民黨頑固派的斗爭(zhēng)中要堅(jiān)持“人不犯我，我不犯人，人若犯我，我必犯人”的自衛(wèi)立場(chǎng)和“有理、有利、有節(jié)”的原則。這些策略原則使黨得以在復(fù)雜多變的環(huán)境里更加熟練而恰當(dāng)?shù)靥幚斫y(tǒng)一戰(zhàn)線中的各種棘手問題，避免犯“左”、右傾錯(cuò)誤。
在此期間，針對(duì)國(guó)民黨大肆鼓吹“共產(chǎn)主義不適合中國(guó)國(guó)情”等反共謬論，黨在政治思想戰(zhàn)線上同國(guó)民黨展開論戰(zhàn)，批判和揭露各種假三民主義，著重闡述三民主義與共產(chǎn)主義的關(guān)系，說明共產(chǎn)主義的最低綱領(lǐng)和新三民主義基本相同，但兩者又有區(qū)別，共產(chǎn)黨將同一切真誠(chéng)的三民主義者長(zhǎng)期合作。這場(chǎng)論戰(zhàn)對(duì)新民主主義理論體系的形成起了推動(dòng)作用。
為了駁斥國(guó)民黨頑固派的反共宣傳，向全黨和全國(guó)人民闡明共產(chǎn)黨對(duì)于中國(guó)革命及其前途的全部見解，回答中國(guó)向何處去這個(gè)關(guān)系重大的問題，更好地指導(dǎo)抗戰(zhàn)和中國(guó)革命，毛澤東進(jìn)行了大量的理論研究工作。他系統(tǒng)總結(jié)中國(guó)革命的獨(dú)創(chuàng)性經(jīng)驗(yàn)，于1939年底1940年初先后發(fā)表《<共產(chǎn)黨人>發(fā)刊詞》、《中國(guó)革命和中國(guó)共產(chǎn)黨》、《新民主主義論》等著作，完整地闡述了新民主主義理論。
毛澤東指出，半殖民地半封建社會(huì)的性質(zhì)，決定了中國(guó)革命必須分成兩步走，第一步進(jìn)行民主主義革命，第二步進(jìn)行社會(huì)主義革命。中國(guó)民主革命在五四運(yùn)動(dòng)以后已經(jīng)不是資產(chǎn)階級(jí)領(lǐng)導(dǎo)的民主革命，而是新民主主義的革命。新民主主義革命是無產(chǎn)階級(jí)領(lǐng)導(dǎo)的人民大眾的反帝反封建的革命。區(qū)別新舊民主主義革命性質(zhì)的根本標(biāo)志是無產(chǎn)階級(jí)領(lǐng)導(dǎo)權(quán)問題。
新民主主義革命的基本綱領(lǐng)是:政治上，推翻帝國(guó)主義和封建主義的壓迫，在中國(guó)建立一個(gè)以無產(chǎn)階級(jí)為領(lǐng)導(dǎo)的、以工農(nóng)聯(lián)盟為基礎(chǔ)的各革命階級(jí)聯(lián)合專政的民主共和國(guó)。經(jīng)濟(jì)上，沒收操縱國(guó)計(jì)民生的大銀行、大工業(yè)、大商業(yè)，建立國(guó)營(yíng)經(jīng)濟(jì)；沒收地主土地歸農(nóng)民所有，并引導(dǎo)農(nóng)民發(fā)展合作經(jīng)濟(jì)；允許民族資本主義經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和富農(nóng)經(jīng)濟(jì)的存在。文化上，廢除封建買辦文化，發(fā)展民族的科學(xué)的大眾的文化。
新民主主義的發(fā)展前途，必然是社會(huì)主義。新民主主義革命和社會(huì)主義革命是兩個(gè)不同的革命階段，不能畢其功于一役，但兩個(gè)革命階段必須也必然是相互連接的，不容橫插一個(gè)資產(chǎn)階級(jí)專政。實(shí)現(xiàn)黨在民主革命階段的最低綱領(lǐng)，也是為著將來實(shí)現(xiàn)最高綱領(lǐng)。新民主主義革命是以共產(chǎn)主義思想為指導(dǎo)的。
統(tǒng)一戰(zhàn)線，武裝斗爭(zhēng)，黨的建設(shè)，這是中國(guó)共產(chǎn)黨在中國(guó)革命中戰(zhàn)勝敵人的三個(gè)主要法寶?！敖y(tǒng)一戰(zhàn)線和武裝斗爭(zhēng)，是戰(zhàn)勝敵人的兩個(gè)基本武器。統(tǒng)一戰(zhàn)線，是實(shí)行武裝斗爭(zhēng)的統(tǒng)一戰(zhàn)線。而黨的組織，則是掌握統(tǒng)一戰(zhàn)線和武裝斗爭(zhēng)這兩個(gè)武器以實(shí)行對(duì)敵沖鋒陷陣的英勇戰(zhàn)士?！?/p>
以毛澤東為主要代表的中國(guó)共產(chǎn)黨人創(chuàng)立的新民主主義理論，是馬克思列寧主義同中國(guó)革命實(shí)際相結(jié)合的產(chǎn)物，是中國(guó)革命特別是建黨以來歷史經(jīng)驗(yàn)的全面總結(jié)，是毛澤東思想在抗戰(zhàn)時(shí)期最重大的理論成果。它的提出，使全黨和全國(guó)人民對(duì)中國(guó)新民主主義革命的性質(zhì)、內(nèi)容、領(lǐng)導(dǎo)權(quán)和發(fā)展前途等有了明確而完整的認(rèn)識(shí)，對(duì)中國(guó)革命的勝利發(fā)展具有重大的指導(dǎo)作用。